PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

can cause severe systemic inflammatory disease in pigs, mainly during the nursery phase. Streptococcus suis is a reemergent pathogen, and outbreaks of its inducing disease represent significant economic losses for the pig industry worldwide. In this study, we described the clinical, pathological, and molecular aspects of an outbreak of S. suis infection with atypically high mortality. The outbreak occurred in nursery farms integrated into a cooperative in the state of Paraná, Brazil. Of the 30 nurseries, 10 were severely affected by the pathogen and had high economic losses. Clinical signs usually started approximately 10 days after weaning and were mainly characterized by acute nervous and locomotor disorders. The mortality of the affected batches usually ranged between 8% and 10%, but in some cases, it reached 18%. Nine piglets were submitted to post mortem examination. Macroscopically, the synovial joints were enlarged and contained fibrinous exudates. In the central nervous system, there was hyperemia of the leptomeningeal vessels associated with deposition of fibrin and purulent exudate in the leptomeninges. In three piglets, there was thickening of the choroid plexus associated with dilation of the lateral ventricles. Microscopic lesions were characterized mainly by fibrinosuppurative inflammation, which involved the synovial membranes, leptomeninges of the brain, and spinal cord. Furthermore, it also affects the choroid plexus, ependyma, nerve roots, and central canal of the spinal cord. S. suis was isolated from the cerebrospinal fluid, meningeal swabs, and/or synovial fluid of 8/9 piglets, and typified as serotype 9 by multiplex PCR.

• Swine diseases nervous system meningitis choroiditis encephalomyelitis spinal cord Streptococcus suis pigs

Abstract in Portuguese:

Streptococcus suis é um patógeno Gram positivo que habita o trato respiratório superior e pode causar doença inflamatória sistêmica grave em suínos, principalmente durante a fase de creche. Streptococcus suis é um patógeno reemergente e surtos representam perdas econômicas significativas a suinocultura mundial. Neste estudo descrevemos os aspectos clínicos, patológicos e moleculares de um surto de infecção por S. suis com mortalidade atipicamente alta. O surto ocorreu em creches integradas a uma cooperativa do estado do Paraná, Brasil. Das 30 creches, 10 foram severamente afetadas pelo patógeno e apresentavam elevadas perdas econômicas. Os sinais clínicos iniciavam em torno de 10 dias após o desmame e eram caracterizados principalmente por sinais clínicos nervosos e locomotores agudos. A mortalidade dos lotes afetados variava entre 8% e 10%, mas em alguns casos ultrapassava 18%. Nove leitões foram submetidos ao exame post mortem. Macroscopicamente, as articulações sinoviais estavam aumentadas e continham exsudato fibrinoso. No sistema nervoso central havia hiperemia dos vasos leptomeníngeos associada a deposição de fibrina e exsudato purulento nas leptomeninges. Em três leitões havia espessamento do plexo coroide associado a dilatação dos ventrículos laterais. As lesões microscópicas eram caracterizadas principalmente por inflamação fibrinossupurativa que envolvia as membranas sinoviais, as leptomeninges do cérebro e medula espinhal. Além disso, também afetava o plexo coroide, epêndima, raízes nervosas e canal central da medula espinhal. S. suis foi isolado do líquido cefalorraquidiano, suabe de meninge e/ou líquido sinovial de 8/9 leitões e tipificado como sorotipo 9 por PCR multiplex.

• Doenças de suínos sistema nervoso meningite coroidite encefalomielite medula espinhal Streptococcus suis suínos

Abstract in English:

ABSTRACT.- Calderaro F.F., Moreno L.Z., Doto D.S., Matajira C.E.C., Gomes V.T.M., Ferreira T.S.P., Mesquita R.E. & Moreno A.M. 2016. Characterization of Streptococcus suis through serotyping, SE-AFLP and virulence profile. Pesquisa Veterinária Brasileira 36(8):701-704. Laboratório de Sanidade Suína e Virologia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, Cidade Universitária, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: morenoam@usp.br Streptococcus suis is one of most important pathogens in the swine industry worldwide. Despite its importance, studies of S. suis characterization in South America are still rare. This study evaluates S. suis isolates from distinct Brazilian states, from 1999 to 2004, and its molecular and serological characterization. A total of 174 isolates were studied. S. suis identification was confirmed by PCR and isolates were further serotyped and genotyped by SE-AFLP and amplification of virulence markers. Serotype 1, 2, 3, 4, 7, 18, 22 and 32 were identified among the studied isolates, and only 4% were characterized as non-typeable. The mrp+/epf+/sly+ genotype was the most frequent. The SE-AFLP analysis resulted in 29 patterns distributed in three main clusters with over 65% of genetic similarity. Isolates presented a slight tendency to cluster according to serotype and origin; however, no further correlation with virulence genotypes was observed.

• Streptococcus suis serotyping genotype virulence genes sorotipagem genótipo genes de virulência

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Calderaro F.F., Moreno L.Z., Doto D.S., Matajira C.E.C., Gomes V.T.M., Ferreira T.S.P., Mesquita R.E. & Moreno A.M. 2016. Characterization of Streptococcus suis through serotyping, SE-AFLP and virulence profile. [Caracterização de Streptococcu Pesquisa Veterinária Brasileira 36(8):701-704. Laboratório de Sanidade Suína e Virologia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, Cidade Universitária, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: morenoam@usp.br Streptococcus suis é um dos patógenos de maior importância para indústria suinícola mundial. Apesar de sua importância, a caracterização de isolados de S. suis na América do Sul ainda é pouco descrita. O presente estudo descreve a avaliação de isolados de S. suis provenientes de diferentes Estados brasileiros, e sua caracterização sorológica e molecular. Foram avaliados 174 isolados de S. suis e os mesmos foram submetidos a SE-AFLP e pesquisa de marcadores de virulência. Os sorotipos 1, 2, 3, 4, 7, 18, 22 e 32 foram identificados dentre os isolados estudados e apenas 4% foram caracterizados como não tipáveis. O perfil de virulência mrp+/epf+/sly+ foi o mais frequente. A análise do SE-AFLP resultou em 29 perfis distribuídos em três grupos principais com mais de 65% de similaridade genética. Os isolados apresentaram tendência de se agrupar segundo origem e sorotipo; no entanto, não foi observada correlação entre os grupamentos e os perfis de virulência.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Pagnani K.J.R., Pestana de Castro A.F., Gottschalk M., Silveira, W.D. & Nakazato G. 2002. [Serotyping of Streptococcus suis strains isolated from pigs in the States of São Paulo, Minas Gerais e Paraná, Brazil.] Sorotipagem de amostras de Streptococcus suis isolados de suínos em granjas dos Estados de São Paulo, Minas Gerais e Paraná. Pesquisa Veterinária Brasileira 22(1):1-5. Depto Microbiologia e Imunologia, Instituto de Biologia, Universidade Estadual de Campinas (Unicamp), Campinas, SP 13081-970, Brazil. Streptococcus suis infection in swine is common in all countries where hog production is well developed. This infection has been associated with bronchopneumonia, meningitis, arthritis, pericarditis, myocarditis, endocarditis, fibrinous polyserositis, septicaemia, rhinitis, and abortion. Streptococcus suis has also been described as a pathogen for ruminants and humans. In Brazil there are severa! clinical evidences about the existence of S. suis disease in pigs affecting more than 50% of farms in States of São Paulo, Minas Gerais and Paraná. In the present research 51 strains of S. suis isolated from piggeries of the States of São Paulo, Minas Gerais and Paraná were collected from different pathologies such as septicaemia, meningitis, arthritis and pneumonia and been recovered either in pure culture oras the predominant organism from porcine tissues. Culture of specimens was carried out on 5% bovine blood agar plates incubated at 37ºC for 24 hr: For the biochemical identification the a-hemolytic colonies of all capsulated isolates were submitted to various conventional tests, such as hydrolysis of arginine, Voges-Proskauer Test, and production of acid from various carbohydrates (inulin, salicin, trehalose, lactose, sucrose, sorbitol, mannitol and glycerol). The strains were also tested for their ability to grow in the presence of 6,5% NaCI and for the amylase production. In addition strains were tested by Api Strep 20 to confirm the identification of S.suis. For capsular typing only capsulated strains were typed by co-agglutination test, using antisera raised in rabbits against all reference strains from serotypes 1 to 8. Strains belonging to other serotypes were also typed. The co-agglutination was used for serotyping and the capsular reaction test was carried out for mieasuring the potency of the prepared antisera. From the total of 51 examined strains the following results were obtained, with regard to serotyping: 30 (58,8%) were serotype 2, 11 (21,6%) were serotype 3, seven (13, 72%) were serotype 7, two (3,92%) were serotype 1 and one strain belonged to serotype 14 (1,96%). As far as we are concerned, this is the first report on the isolation of a large number of S. suis strains in Brazil, from cases of illness caused by this bacterium among piglets. Also it was carried out serotyping of the isolates, showíng a high prevalence of serotype 2, as compared to other known serotypes of S. suis.

• Streptococcus suis isolation serotyping co-agglutination isolamento sorotipagem co-aglutinação.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Pagnani K.J.R., Pestana de Castro A.F., Gottschalk M., Silveira, W.D. & Nakazato G. 2002. [Serotyping of Streptococcus suis strains isolated from pigs in the States of São Paulo, Minas Gerais e Paraná, Brazil.] Sorotipagem de amostras de Streptococcus suis isolados de suínos em granjas dos Estados de São Paulo, Minas Gerais e Paraná. Pesquisa Veterinária Brasileira 22(1):1-5. Depto Microbiologia e Imunologia, Instituto de Biologia, Universidade Estadual de Campinas (Unicamp), Campinas, SP 13081-970, Brazil. Infecções causadas por Streptococcus suis são muito comuns em países onde a indústria de carne suína é desenvolvida. Estas infecções estão relacionadas a casos clínicos de broncopneumonia, meningite, artrite, pericardite, miocardite, endocardite, poliserosite fibrinosa, septicemia, rinite e aborto. Esta bactéria também foi descrita como patógeno de ruminantes e humanos. No Brasil há evidências clínicas da existência de processos infecciosos causados por S. suis afetando mais de 50% das granjas em Estados como São Paulo, Minas Gerais e Paraná. No presente estudo foram isoladas 51 amostras de 5. suis de granjas do Estados acima referidos, coletadas de diferentes casos clínicos como septicemia, meningite, artrite e pneumonia, tendo sido obtidas ou em cultura pura ou como patógeno de maior predominância nos tecidos de suínos. Este material foi semeado em Columbia ágar sangue adicionado de 5% de sangue bovino e incubado a 37ºC por 24 horas. Para a identificação bioquímica as colônias que apresentavam a-hemólise, bem como as amostras padrão, foram submetidas a testes convencionais para a confirmação da espécie 5. suis, tais como: hidrólise de arginina, teste de Voges-Proskaue1: e produção de ácido a partir de vários carboidratos (inulina, salicina, trealose, lactose, sacarose, sorbitol, manitol e glicerol). As amostras também foram testadas para habilidade de crescimento em meio de TSA com 6,5% de NaCI e para a produção de amilase. Todas as amostras que fizeram parte desta pesquisa foram testadas pelo sistema Api 20 Strep para confirmação dos resultados obtidos nos testes convencionais. Para a sorotipagem foram produzidos antissoros de 1 a 8. Outras amostras não pertencentes a estes sorotipos também foram sorotipadas. O antissoro produzido em coelhos foi titulado pelo teste de aglutinação em tubo com 2-mercaptoetanol e pelo teste de reação capsular e, quando adequados, foram usados no teste de co-aglutinação, para a sorotipagem das amostras de 5. suis. A sorotipagem das 51 amostras isoladas mostraram os seguintes resultados: 30 (58,8%) foram classificadas corno sorotipo 2, 11 (21,6%) das amostras como sorotipo 3, sete (13,72%) como sorotipo 7, duas (3,92%) como sorotipo 1 e uma amostra como pertencente ao sorotipo 14 (1,96%). Este é o primeiro relato do isolamento de um grande número de amostras de 5. S. suis no Brasil, de casos típicos de processos infecciosos causados por esta bactéria. Também foi realizada a sorotipagem dos isolados, mostrando uma alta prevalência do sorotipo 2, quando comparada com a dos demais sorotipos encontrados.

Abstract in English:

An epidemiological study of streptococcal menigitis in pigs was carried out in 33 farms in the regions of Alto Uruguai Catarinense, Santa Catarina, Brazil. Outbreaks occurred all around the year and in 26 farms, 4 or more outbreaks were observed, indicating that the disease in this region is endemic with a sporadic occurrence. Animals were affected from birth to slaughter, being more frequent in growing pigs. Morbidity, mortality and number of outbreaks were studied in relation to degree of hygiene of each farm. The farms were divided in two groups, one with good hygiene and another with poor hygiene. In 15 farms with good hygiene, morbidity rates were, respectively, 2.6 ± 0.48%(X̅ ± Sx) and 2.11 ± 0.45%. These rates wére not significantly different from those observed in,farms with poor hygiene which were 4.54 ± 1.54% and 2.67 ± 0.52%, respectively. Pigs with clinical signs of meningitis from all farms studied in the present experiment were necropsied. They showed congestion and edema of meninges. Histological lesions were characterized, during the first 48 hours by purulent meningitis and ependymitis with perivascular cuffing, mainly neutrophils, in the nervous tissue localized next to the meninges and ependima. Such lesions were present in every section of all the brains and spinal cords under investigation. In animals that had been sick for more than 48 hours, neutrophils were replaced by mononuclear cells. This was observed in the nervous tissues and latter in the meninges. Streptococcus spp. were isolated from 21 pigs, 12 ofwhich were classified as Streptococcus suis type II and 9 asStreptococcusfaecalis (enterococcus). The experimental reproduction of the disease was carried out in two experiments. In the first experiment, twelve, 28 days old Landrace piglets, from several litters were divided into four groups of 3 animals each. Animals from group 1 were inoculated intranasally with a strain of S. suis type II passaged once in embrionated eggs. Animals from group 2 were inoculated similary with a strain of S. suis type II passaged in piglets. Groups 3 and 4 were inoculated with another sample passaged also in embrionated eggs and piglets, respectively. One piglet frorn the second group and another from the third showed clinical signs _and pathological evidences of the disease. S. suis type II was recovered from them. In the second experiment, 52 Landrace pigs, 28 days old, were divided into four groups of 13 pigs each. The first and second groups were inoculated with the two samples of the first experiment. Group 3 was inoculated with one sample of Streptococcusfaecalis isolated during the epiderniological study. All samples were instilled nasally. The disease was reproduced in only one pig inoculated with S. suis type II.

• Swine streptococcal meningitis epidemiology pathology Streptococcus suis type II

Abstract in Portuguese:

Realizou-se um estudo epidemiológico de meningite estrepcocócica dos suínos em 33 rebanhos da região do Alto Uruguai Catarinense. Em 26 desses rebanhos a doença tinha sido observada 4 ou mais vezes, indicando que é uma enfermidade endêmica de ocorrência esporádica, acontecendo em todas as épocas do ano, afetando animais desde o nascimento até o abate, sendo, porém, mais freqüente em animais de recria. As taxas de morbidade e mortalidade foram estudadas para rebanhos com diferentes graus de higiene. Em 15 rebanhos com boas condições de higiene, a morbidade foi de 2,6 ± 0,48% (X̅± Sx) e a mortalidade de 2,11 ± 0,45%. Essas taxas não diferiram significativamente das observadas em 18 rebanhos do segundo grupo, de más condições de higiene, que foram 4,53 ± 1,54% e 2,67 ± 0,52%, respectivamente. Foram necropsiados animais com manifestações nervosas provenientes de cada um dos rebanhos estudados. As alterações macroscópicas mais evidentes foram edema submeníngeo e congestão das meninges. Histologicamente observou-se meningite e ependimite purulenta, nas primeiras 48 horas, com acúmulo perivascular, principalmente de neutrófilos, nas regiões adjacentes às meninges e epêndima, sendo que as lesões distribuiam-se igualmente nas diversas secções do sistema nervoso central. Quando a doença teve um curso maior de 48 horas, os neutrófilos foram substituídos por células mononucleares, observando-se encefalite linfocitária. Isolaram-se estreptococos do sistema nervoso central de 21 suínos, com manifestações clínicas, sendo que de 12 desses foi isolado Streptococcus suis tipo II, e de 9, Streptococcus faecalis. A reprodução experimental da doença foi feita em duas etapas; na primeira foram utilizados 12 suínos machos da raça Landrace, com 28 dias de idade, retirados de diferentes leitegadas, sendo divididos em 4 grupos com 3 leitões por grupo. O primeiro grupo foi instilado por via nasal com uma amostra de S. suis tipo II, passada por ovos embrionados; o segundo com a mesma amostra passada em leitão; os grupos 3 e 4 foram instilados pela mesma via com outra amostra de S. suis tipo II, passada por ovos embrionados e leitão, respectivamente. Um suino do segundo grupo e outro do terceiro apresentaram manifestações e patologia características da enfermidade, reisolando-se o agente causal após a necropsia. Para a segunda etapa foram utilizados 52 suínos machos e fêmeas da raça Landrace, com 28 dias de idade e divididos em 4 grupos com 13 leitões por grupo, ficando um grupo como controle. Utilizaram-se as duas amostras de S. suis tipo II reisoladas do primeiro experimento e uma de Streptococcus faecalis (enterococo) recém-isolada de um surto no qual os animais apresentavam manifestações de meningite estreptocócica. Todas as amostras foram instiladas no nariz. A doença foi reproduzida somente em um suíno dos instilados com S. suis Tipo II.

• Suínos meningite estreptocócica epidemiologia patologia Streptococcus suis tipo II